RNAase 是广泛存在的，可引起 RNA 降解，破坏 RNA 完整性。天然型和重组型的 RNase 抑制剂是 50kDa 大小的蛋白，通过非共价结合 RNase 以 1： 1 的比例抑制 RNase A 家族和人胎盘 RNase。 对于下游应用，如 GoScript™ 逆转录酶、 AMV / M-MLV 逆转录酶、SP6、T7/T3 RNA 聚合酶和 Taq DNA 聚合酶，重组 RNasin 抑制剂不抑制 RNase T1、S1 核酸酶、曲霉 RNase、RNase H、RNase ONE 核糖核酸酶和下游应用的酶。
RNasin® Plus RNase Inhibitor ( RNasin® RNA 酶抑制剂 ) 是一种作为可溶性蛋白在 E. coli 中表达的重组哺乳动物 RNase 抑制剂，可以利用离子交换和疏水层析相结合的方法纯化获得。该蛋白能够抑制真核 RNase( 如 RNase A 和 RNase B) 活性，与人胎盘 RNase 抑制剂相似。
RNasin® Plus RNase Inhibitor 经过 RT-PCR 检验，能与 AMV、M-MLV 和 ImProm-II™ Reverse Transcriptases 或 Taq 及 Tfl DNA Polymerases 兼 容。 RNasin® Plus RNase Inhibitor 在 TaqMan® 检测中发现也能和定量、实时 RT-PCR 兼容。与人源的这种蛋白相比，该抑制剂具有更高的抗氧化活性。研究表明，来源于人的该蛋白的两个半胱氨酸对氧化非常敏感，并形成二硫键封闭了抑制剂的活性位点。由于天然氨基酸的多样性，RNasin® Plus RNase Inhibitor 不能形成封闭位点的二硫键。
此外，这种重组蛋白具有以前从未认识的特性，即在 50℃以上能持续抑制 RNase。将 RNasin® Plus RNase Inhibitor 和 RNase 的溶液加热再冷却，不会造成 RNase 活性的恢复——即使溶液温度超过 RNasin® Plus 蛋白的变性温度。因此， RNasin® Plus RNase Inhibitor 能够在加热前、加热中及加热后保护 RNA，即使在 RT-PCR 中第一链 cDNA 合成温度下亦如此。将溶液置于 70℃ 15 分钟，没有观察到 RNase 的活性恢复。
扫码关注公众号
