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P2080SBeyoChIP™ ChIP Assay Kit (Protein A/G磁珠)22次1998.00元
BeyoChIP™ ChIP Assay Kit (Protein A/G磁珠)即BeyoChIP™ Chromatin Immunoprecipitation (ChIP) Assay Kit with Protein A/G Magnetic Beads,也称染色质免疫沉淀检测试剂盒或ChIP检测试剂盒(蛋白A/G磁珠),用于通过免疫沉淀来沉淀和目标蛋白结合的染色质片段,最后通过PCR或Southern等方法来检测沉淀的染色质片段的试剂盒。通常用于检测特定的转录因子或组蛋白等基因组DNA结合蛋白是否和预期的特定基因组DNA序列在同一复合物中[1-2]。
通过ChIP检测可以获得在体的(In Vivo)目标蛋白和预期基因组DNA片段是否在同一复合物中的结论。EMSA,也称gel shift获得的结果是体外的(In Vitro)目标蛋白和预期基因组DNA片段的结合结果,可以推断细胞内也发生类似的结合,但并不代表该情况在细胞内也真实发生。而ChIP的检测结果则可明确说明这种结合在细胞内是真实发生的[1-2]。
本ChIP Assay Kit采用了Protein A/G磁珠(Protein A/G Magnetic Beads),和Protein A磁珠或Protein G磁珠相比适合于免疫沉淀更多种类的抗体,包括mouse IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG3, IgA, rat IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG2c, rabbit IgG, rabbit and goat polyclonal Abs,以及human IgG1, IgG2, IgG3和IgG4。磁珠法比琼脂糖法更方便、快捷。常规的琼脂糖法需要长时间离心,而磁珠法无需离心,只需要短时间磁性分离即可,可以有效避免因为离心对免疫复合物造成的机械力影响,充分保证免疫复合物的天然状态。
本试剂盒中经过Salmon Sperm DNA预饱和的Protein A/G Agarose和目的基因组DNA的非特异性结合大大下降。如果ChIP产物用于染色质免疫共沉淀测序(ChIP-Seq),需要从数据中去除可能的Salmon Sperm DNA数据。
提供了预混合的对照引物(Control Primers)。可用于扩增human GAPDH的部分相应序列,引物序列为:5'-TACTAGCGGTTTTACGGGCG-3';5'-TCGAACAGGAGGAGCAGAGAGCGA-3'。
本试剂盒如果用于常规的染色质免疫沉淀,共可以免疫沉淀22个样品。
包装清单:
产品编号产品名称包装
P2080S-1Protein A/G Magnetic Beads/Salmon Sperm DNA3ml
P2080S-2Glycine Solution (10X)30ml
P2080S-3ChIP Dilution Buffer48ml
P2080S-4Low Salt Immune Complex Wash Buffer24ml
P2080S-5High Salt Immune Complex Wash Buffer24ml
P2080S-6LiCl Immune Complex Wash Buffer24ml
P2080S-7TE Buffer48ml
P2080S-80.5M EDTA250µl
P2080S-95M NaCl500µl
P2080S-101M Tris, pH 6.5500µl
P2080S-11SDS Lysis Buffer10ml
P2080S-12Control Primers (5µM each)0.1ml
—说明书1份
保存条件:
4℃保存,一年有效。长期不使用可以-20℃保存,-20℃保存可以保存更长时间。
注意事项:
需自备用于ChIP的一抗,37%甲醛,PBS (C0221A),蛋白酶抑制剂混合物(哺乳动物样品抽提用, 100X) (P1010/P1011)、蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(哺乳动物样品抽提用, 50X) (P1050/P1051)或PMSF (ST506/ST507),Elution Buffer (1% SDS, 0.1M NaHCO3),蛋白酶K (ST532/ST533),Glycogen (DNase, RNase & Protease free) (D0816)或Glycogen (核酸沉淀用) (D0812),Tris平衡苯酚,氯仿,95%乙醇,70%乙醇,3M NaAc (pH5.2) (ST351)以及细胞刮(FSCP023/FSCP029)或细胞铲(FLFT021),磁力架(FMS004/FMS008/FMS016/FMS024)。
需自备样品超声处理仪(sonicator),也称超声粉碎机或超声细胞粉碎机。
使用甲醛时请在通风橱中进行操作。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。