碧云天的脂滴红色荧光检测试剂盒(Nile Red),英文名为Lipid Droplets Red Fluorescence Assay Kit with Nile Red,也称Nile Red Staining Kit或Red Neutral Lipid Stain,是一种基于荧光探针尼罗红(Nile Red)来检测细胞内脂滴(Lipid droplets)的试剂盒。本试剂盒适用于荧光显微镜、流式细胞仪、荧光酶标仪等荧光检测系统。
脂滴是由磷脂单分子层及甘油三酯(Triglyceride)、胆固醇酯(Cholesteryl ester,CE)组成的中性脂肪(Neutral lipid)疏水核心构成,广泛存在于动物、细菌、酵母、植物和昆虫细胞中[1]。脂滴能够沿着细胞骨架运动,并与其它细胞器相互作用,在脂类代谢与存储、膜转运、蛋白降解、以及信号传导过程中起着重要的作用。多种代谢性疾病,如肥胖、脂肪肝、心血管疾病及糖尿病、中性脂贮存性疾病和Niemann Pick C疾病等,可能都伴随着脂质贮存的异常[2]。
本试剂盒所使用的荧光探针为尼罗红(Nile Red),又称Nile blue oxazone,CAS号为7385-67-3,分子量为318.37,其在磷脂(phospholipid)中最大激发光波长约为552nm,最大发射光波长约为636nm,此时为红色荧光;也可以把激发波长设置为450-500nm,发射波长设置为大于528nm,此时为绿色荧光;但红色荧光通常比绿色荧光明亮很多[3]。由于Nile Red在红色荧光时也可以染细胞膜,而在绿色荧光时只染脂滴,所以如果特别关注脂滴的特异性时,也可以设置参数为Ex/Em=485/535nm进行检测[4]。