一般描述

8-氧桥鸟嘌呤是鸟嘌呤的诱变氧化损伤产物。由于细胞中存在活性氧，因此在所有活生物体的DNA中都会产生氧化损伤的碱基8-氧桥鸟嘌呤。DNA损伤威胁着储存在每个DNA分子中的遗传信息的健康；然而，细胞中存在酶以防止这种病变的诱变作用。8-氧桥鸟嘌呤是由氧化应激产生的最丰富和特征最充分的DNA损伤之一。据估计，每个哺乳动物细胞每天约有180个鸟嘌呤被氧化为8-oxoG。8-oxoG是一种错误编码的病变，可导致G:C变为 T:A或 T:A变为G:C颠换突变。随着年龄的增长，这种病变会在DNA中积累，并且与多种癌症和疾病（例如阿尔茨′海默氏症和帕金森′氏症）紧密相关。

特异性

8-氧桥鸟嘌呤。通过竞争性ELISA，单克隆抗体在微摩尔浓度下与dGMP、dAMP、dCMP或TMP没有反应性。仅当浓度增加到毫摩尔范围时才观察到竞争。

免疫原

吸附在氧化铝上的8-氧桥鸟嘌呤

应用

免疫细胞化学：

在多聚甲醛固定的HeLa和Cos7细胞上。8-氧桥鸟嘌呤已定位于营养缺乏细胞的细胞核。

ELISA：

在载玻片上生长的细胞用冷的560nM NaCl；0.1%（v/v）Triton X-100；0.02%（w/v）SDS；10mM磷酸盐缓冲液pH 7.4提取两次，每次30秒，并用新鲜制备的4% PFA固定在室温下5-20分钟。{Conlon，KA et al（2000）J. Histotechnology 23（1）:37-44}。典型的染色表明，提取细胞的细胞核具有确定的染色质浓缩外围和区域。克隆483.15染色在补充DMEM中孵育的细胞中显示出特异性但微弱的核荧光染色，但在无营养的定义盐溶液(NFDSS){1.8mM氯化钙、110mM NaCl、44mM碳酸氢钠，pH 7.5}中孵育的细胞中显示出强烈的核荧光染色，呈点状并呈一般分布。即使在最初的NFDSS处理后，在营养培养基中孵育的细胞中，荧光染色也会消失至背景水平{Conlon等人}。

该抗体的一个先前批次被用于ELISA测定。

最佳工作稀释度必须由最终用户确定。

抗8-氧桥鸟嘌呤抗体（克隆483.15）可检测8-氧桥鸟嘌呤水平，&已发布&验证可用于ELISA&IC。

质量

通过免疫细胞化学对NIH/3T3细胞进行常规评估

免疫细胞化学：

使用抗8-氧桥鸟嘌呤小鼠单克隆抗体对NIH/3T3细胞进行共聚焦荧光分析。

外形

未纯化的小鼠单克隆IgM液体，溶于不含防腐剂的缓冲液中。

储存及稳定性

自收到之日起，以未稀释的等分试样可于-20ºC条件下稳定保存6个月。

处理建议：接收后，在取下盖子之前，离心小瓶并轻轻混合溶液。分装至微量离心管中，并储存于-20°C。避免反复冻融循环，否则可能损坏IgM并影响产品性能。

分析说明

对照

营养缺乏的HeLa或Cos7细胞

其他说明

浓度：关于批次特定浓度请参见检验报告。

法律信息

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany