一般描述
富含鸟嘌呤(G)的单链DNA可以形成稳定的二级结构,称为G-四链体(G-tetrads或G4)。四个鸟嘌呤碱基可以通过胡斯坦氢键结合形成称为鸟嘌呤四联体(G-tetrad)的正方形平面结构,两个或多个G-tetrad可以彼此堆叠形成G-四联体。阳离子,尤其是钾的存在进一步稳定了四链体结构,该阳离子位于每对四联体之间的中央通道中。DNA G-tetrad可以在一条DNA链内(分子内)、两条DNA链(双分子)或四条DNA链(四分子)之间形成。G4 DNA可以出现在基因组中的任何地方,在复制、转录或重组过程中暴露了足够长的单链富含G的DNA。形成四链体的寡核苷酸的化学分析表明,存在大量具有不同稳定性的动态四链体结构。G4 DNA结构的多样性使其成为分子生物医学研究中的一个吸引人的话题。
特异性
克隆1H6结合四分子和单分子(分子内)DNA G-四链体(G4)结构而没有序列特异性,同时对四分子RNA结构或三链体DNA结构表现出明显较低的亲和力,对非G4 ssDNA或ddDNA几乎没有亲和力。但是,克隆1H6似乎不结合[AGGG(TTAGGG)3]单分子G4结构,表明对许多但不是全部DNA G4结构具有广泛的选择性(Henderson,a.,et al.(2014).Nucleic Acids Res. 42(2):860-869)。
靶DNA结构不是物种特异性的。
免疫原
源自具有端粒重复序列的寡核苷酸的KLH偶联的G-四链体DNA。
应用
免疫组织化学分析:一个代表性批次以1:50-250稀释度在人胰腺和小鼠肾脏组织中检测到DNA G-四链体(G4)。
免疫细胞化学分析:一个代表性批次在中期HeLa和鼠胚胎干细胞的致密染色体上检测到离散的DNA G-四链体(G4)聚焦点(Henderson,A.,et al.(2014).Nucleic Acids Res. 42(2):860-869)。
免疫细胞化学分析:在DNase处理低聚甲醛固定和Triton X-100透性化HeLa细胞后,一个代表性批次检测到核DNA G-四链体(G4)免疫反应性的大幅度降低(Henderson,A.,et al.(2014).Nucleic Acids Res. 42(2):860-869)。
免疫细胞化学分析:一个代表性批次在缺乏G4解旋解旋酶FANCJ的鸡DT40细胞中检测到G-四链体(G4)稳定剂端粒抑素/TMS处理诱导的核DNA G4免疫反应性,而在表达人FANCJ的DT40细胞中未观察到药物增强作用(Henderson,A.,et al.(2014).Nucleic Acids Res. 42(2):860-869)。
免疫细胞化学分析:在DNA G4稳定剂端粒抑素/TMS处理后,一个代表性批次检测到U20S细胞中核DNA G-四链体(G4)聚焦点呈时间依赖性增加(Henderson,A.,et al.(2014).Nucleic Acids Res. 42(2):860-869)。
ELISA分析:通过竞争性ELISA测定代表性批次的目标选择性。克隆1H6结合四分子和单分子(分子内)DNA G-四链体(G4)结构(Henderson,A.,et al.(2014).Nucleic Acids Res. 42(2):860-869)。
流式细胞术分析:在用DNA G4稳定剂TMPyP4(目录号613560)处理后,一个代表性批次在HeLa细胞中检测到增强的DNA G-四链体(G4)免疫反应性(Henderson,A.,et al.(2014).Nucleic Acids Res. 42(2):860-869)。
免疫组织化学分析:一个代表性批次在各种石蜡包埋的人体组织切片中检测到核DNA G-四链体(G4)免疫反应性,包括皮肤、胰腺、睾丸、胎盘、脑、阑尾、结肠和肾脏(Henderson,A.,et al.(2014).Nucleic Acids Res. 42(2):860-869)。
研究子类别
核受体
研究类别
表观遗传学&核功能
该抗DNA G-四链体(G4)抗体(克隆1H6)经验证可用于免疫细胞化学、免疫组织化学(石蜡)、ELISA和流式细胞术检测DNA G-四链体。
质量
通过免疫细胞化学在HeLa细胞中进行评估。
免疫细胞化学分析:2.0 µg/mL该抗体可在HeLa细胞中检测到DNA G-四链体(G4)。
外形
形式:纯化
纯化的小鼠单克隆IgG2bκ抗体,溶于含0.1 M Tris-甘氨酸(pH 7.4)、150 mM NaCl和0.05%叠氮化钠的缓冲液中。
纯化蛋白G
储存及稳定性
自接收之日起,在2-8°C下可稳定保存1年。
其他说明
浓度:请参考特定批次的数据表。
免责声明
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