碧云天的BeyoFast™ SYBR Green One-Step qRT-PCR Kit是一种基于SYBR Green染料用于一步法反转录实时荧光定量PCR,即qRT-PCR(Quantitative Reverse Transcription PCR)或real-time RT-PCR的高品质预混液,主要用于RNA的特异性超高灵敏度定量检测。
BeyoFast™ SYBR Green One-Step qRT-PCR Kit以提取的RNA为模版,使用qPCR引物在同一反应管内连续进行反转录和荧光定量PCR,操作简单快速,最大限度地减少人为误差,有效降低污染风险,节约PCR实验的操作时间,检测通量大。
本产品整合了高效的BeyoRT™ M-MuLV Reverse Transcriptase、RNase Inhibitor和优异的抗体结合型热启动BeyoFast™ Taq DNA Polymerase,并优化了缓冲体系,反转录性能优、检测灵敏度高、扩增特异性强、反应稳定性好,非常适合于內源低丰度RNA、外源病毒RNA等微量RNA的检测。
BeyoFast™ SYBR Green One-Step qRT-PCR Kit使用SYBR Green I作为染料。SYBR Green I是一种结合于双链DNA(double-strand DNA, dsDNA)双螺旋小沟区域的绿色荧光染料。SYBR Green I在游离状态下的荧光比较微弱,一旦与双链DNA结合后,其荧光会大大增强。这样通过检测荧光强弱就可以定量检测PCR过程中扩增产生的双链DNA的数量。
本产品使用的BeyoFast™ Taq DNA Polymerase是一种与抗体结合的高品质热启动酶,能够实现便捷高效的热启动。BeyoFast™ Taq DNA Polymerase中的Taq酶与抗Taq酶的单克隆抗体相互结合,从而抑制了Taq酶的DNA聚合酶活性,这样可以有效避免在低温条件下由引物和模板DNA非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。在PCR反应的预变性步骤中抗体会被加热失活,这样可以确保仅在预变性后才会把Taq酶的活性释放出来,预变性之前不会发生DNA聚合反应,从而大大提高了PCR反应的特异性、灵敏度和定量检测的准确性。
本产品包含了BeyoRT™ M-MuLV Reverse Transcriptase、BeyoFast™ Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、SYBR Green I荧光染料、稳定剂、Nuclease-free Water、ROX (根据不同荧光定量PCR仪进行选择)和镁离子等所有的通用组分,使操作更简单、使用更便捷。用户只需自备引物和样品RNA即可